کروماتوگرافی لایه نازک

لینک دریافت فایل خرید پایین توضیحات

فرمت word  قابل ویرایش پرینت

تعداد صفحات: 8

کروماتوگرافی لایه نازک (TLC)

کروماتوگرافی لایه نازک نوعی کروماتوگرافی جذبی جامد – مایع اصول مانند کروماتوگرافی ستونی است. ولی جسم جاذب جامد صورت یک لایه نازک یک قطعه شیشه پلاستیک محکم پخش میکنند. یک قطره محلول نمونه مجهول نزدیکی لبه میگذارند مقدار کافی حلال استخراج کننده ظرفی قرار میدهند. مقدار حلال باید انقدر باشد فقط سطح زیر لکه برسد (شکل الف). حلال طرف بالای میرود اجزاء مخلوط سرعتهای متفاوت خود میبرد. نتیجه ممکن تعدادی لکه ظاهر شود. لکه یک خط عمود سطح حلال ظرف قرار میگیرند (شکل ب).

این روش کروماتوگرافی بسیار اسان سرعت انجام میشود. روش تفکیک اجزاء یک مخلوط بسیار مفید همچنینی میتوان تعیین بهترین حلال استخراج کننده جهت کروماتوگرافی ستونی استفاده کرد.

در TLC میتوان همان مواد جامد کروماتوگرافی ستونی استفاده میشود استفاده کرد میان سیلیکا الومینا بیشتر کار میرود. معمولا جسم جاذب مقدار کمی ماده نگهدارنده مانند گچ شکسته بندی، کلسیم سولفات نشاسته مخلوط میکنند جسم جاذب چسبندگی لازم پیدا کند بچسبد. میتوان قبل مصرف تهیه کرد ورقه پلاستیکی اماده بازار موجود استفاده نمود.

یکی مزایای مشخص TLC احتیاج مقدار بسیار کمی نمونه دارد. بعضی موار میتوان مقدار 9-10 گرم تشخیص داد. اما ممکن اندازه نمونه 500 میکرو گرم برسد. نمونه زیاد میتوان تجربه تهیه استفاده کرد. تجربه لکه مختلف میتراشند یک حلال مناسب میشویند (استخراج میکنند). شناسایی (از طریق طیف سنجی) کار میبرند.

تشخیص لکه رنگین کروماتوگرام اسان تعیین محل لکه اجسام بیرنگ روشهای متعددی وجود دارد. مثال میتوان تابش نور ماوراء بنفش محل لکه، ترکیبهایی خاصیت فلویورسانس دارند مشخص کرد. روش دیگر میتوان جسم جاذب ماده فلویورسانس دار اثر دیگری مخلوط کرد. هنگامی نور ماوراء بنفش بتابد، لکه اجسامی نور ماورای بنفش جذب کنند ولی خاصیت فلویورسانس ندارند زمینه فلورسانس دار صورت تیره رنگ ظاهر میشوند. بسیاری موارد دیگر، معرفهای اشکارساز دیگری استفاده میکنند. معرفها میتوان کروماتوگرام پاشید لکه ظاهر کرد. سولفوریک اسید، بسیاری ترکیبات الی ذغال تبدیل میکند محلول پتاسیم پرمنگنات نمونه معرفهای اشکار ساز هستند روش مصرف میشوند. ید معرف اشکار ساز دیگری مصرف میشود. دز ظرفی میگذارند محیط بخار ید اشباع باشد. بسیاری ترکیبات الی ید جذب میکنند لکه انها کروماتوگرام رنگین (معمولا قهوه ای) میشود.

در شرایط معین سرعت حرکت ترکیب نسبت سرعت پیشرفت حلال (Rf) خاصیت مشخصی ترکیب است. تعیین مقدار مسافتی جسم خط شروع وسط لکه طی کرده اندازه میگیرند انرا مسافتی حلال پیموده تقسیم میکنند. مسافت خط شروع یکسانی میسنجند.

بخش عملی

تفکیک مواد رنگی برگ سبز

چند میلی لیتر مخلوط 2 یک اتر نفت اتانول چند برگ سبز هاونی بگذارید برگها دسته هاون له کنید. مایع بدست امده یک قیف جدا کننده منتقل کنید همان حجم اب مقطر اضافه کنید تکان دهید. فاز ابی پایینی دور بریزید. شستشو دو بار انجام دهید هر بار فاز ابی دور بریزید. اب تازه اضافه کنید.لایه الی (بالایی) ارلن کوچکی منتقل کنید 2 گرم سدیم سولفات بدون اب اضافه کنید (برای اب گیری).